
حجم فایل : 256.4 KB
نوع فایل : پاور پوینت
تعداد اسلاید ها : 22
بنام خدا آزمايش هاي كيفي اسيدهاي آمينه وپروتئين ها اسيدهاي آمينه تعريف :
واحدساختماني پروتئين ها
بيش از 300 نوع درطبيعت يافت شده
فقط 20 نوع درپروتئين هاي انساني يافت شده
تعداد و نوع وتوالي وارتباط فضائي آنها ساختمان سه بعدي وخواص بيولوژيك پروتئين را مشخص مي كند طبقه بندي اسيدهاي آمينه
الف)براساس خواص فيزيكوشيميائي وقطبيت اسيدهاي آمينه خنثي (بدون بار)
اسيدهاي آمينه باردار
ّّب ) براساس ريشه اسيدآمينه (ريشه R)
اسيدهاي آمينه خطي ( گليسين......)
اسيدهاي آمينه حلقوي (تيروزين،تريپتوفان،.......)
روش هاي تشخيص افتراقي اسيدهاي آمينه وپروتئين ها : روش هاي شيميايي
روش هاي فيزيكي :
الف) كروماتوگرافي
ب ) الكتروفورز آزمايش هاي شيميايي اسيدهاي آمينه : 1- آزمايش نين هيدرينNinhydrin
شناسايي كليه اسيدهاي آمينه .....آزمايش نين هيدرين: هدف :شناسايي قسمت مشترك همه اسيدهاي آمينه
اساس:
نين هيدرين باعث دزآمينه ودكربوكسيله شدن اسيدآمينه شده
ودرانتها كمپلكس رومان (Rhoman) به رنگ بنفش
تشكيل مي شود. واكنش نين هيدرين نكات مورد توجه : ايجاد گاز CO2 دليل بروجوداسيدآمينه است .
اسيدهاي آمينه پرولين وهيدروكسي پرولين به علت ساختمان خاص درپايان اين واكنش رنگ ديگري ايجاد
مي كنند.
روش كار :
به 2 ميلي ليتراز محلول مجهول 1 ميلي ليتراز معرف
نين هيدرين اضافه نموده و 5 دقيقه در بن ماري جوش
بگذاريد.
جواب مثبت : رنگ بنفش
جواب مثبت براي پرولين
وهيدروكسي پرولين : رنگ زرد 2- آزمايش زانتو پروتئيك Xantho proteic هد ف : شناسايي اسيدهاي آمينه حلقوي ازخطي از طريق تشخيص حلقه بنزني
اساس: اسيدنيتريك غليظ باحلقه بنزني ايجاد مشتقات نيتره حلقه بنزن (زردرنگ) رامي دهد.ادامه واكنش باسود40 درصد وايجاد رنگ نارنجي است. روش كار : به 2 ميلي ليتر از اسيدآمينه مجهول 2ميلي ليتر اسيدنيتريك غليظ (توسط پي پتور) اضافه نموده وبه مدت 5دقيقه در
بن ماري جوش قراردهيد.
جواب مثبت : رنگ زرد
ادامه واكنش :
پس ازسردنمودن لوله حدود 5-3 ميلي ليترسود40 درصداضافه نمائيد.
جواب مثبت : رنگ نارنجي
3- آزمايش ميلونMilon هدف : شناسايي اختصاصي اسيدآمينه تيروزين(تشخيص حلقه فنلي)
اساس: معرف ميلون (شامل نيترات ونيتريت جيوه) با حلقه فنلي تركيب خاصي بوجود مي آورد. روش كار :
به 2 ميلي ليتر اسيد آمينه تيروزين 2 ميلي ليتر معرف ميلون اضافه نموده ولوله را به مدت 5-2 دقيقه در بن ماري جوش قراردهيد.
<b...