مرجع دانلود پاورپوینت های درسی

حجم فایل : 838.0 KB
نوع فایل : پاور پوینت
تعداد اسلاید ها : 41
بنام خدا الکتروفورز مولکولهای بیولوژیکی
الكترو فورز چيست؟ روشي براي جداسازي و مطالعه مولكولهاي بيو لوژيكي
پروتئين
اسيد هاي نوكلئيك
قند ها
نمونه هايي که بار الکتريکي دارند، تحت تأثير يك ميدان الكتريكي از ميان شبکه اي متخلخل حركت مي کنند و از يکديگر جدا مي شوند. تاريخچه اولين تجارب در جداسازي ماكرومولكولها توسط الکتروفورز دوبعدي به کارهاي Smithies  و Poulik در سال 1956 باز مي گردد
جداسازي پروتئين هاي سرم
دهه 40 و 50 نقطه ي عطف در توسعة الكتروفورز
الكتروفورز ژل پلي آكريل آميد به همراه سديم دو دسيل سولفات در سال 1970
زمينه هاي كاربردي تعيين جرم مولكولي نسبي (Mr)
مشخص كردن غلظت پروتئين
شناسايي تغييرات پروتئين و DNA
تعيين نقشه پپتيدي
و... فاكتورهاي مهم ميزان بار الكتريكي نمونه
وزن نمونه
اندازه و شكل نمونه
ميزان ولتاژ و جريان اعمالي
نوع ژل و ميزان تخلخل آن
نحوه آماده سازي نمونه
نحوه رنگ اميزي
عوامل محيطي اثر حرارت براي حفظ تکرار پذيري, ثابت نگاه داشتن حرارت در تمام مراحل الکتروفورز بسيار مهم است
انتقال گرما باعث بروز بي نظمي در اندازه ي منافذ ژل
شکستن شيشه هاي الکتروفورز,

حرارت ايجاد شده بر اثر مقاومتي است که الکترودها, بافر مورد استفاده, و ژل دارند و به گرماي ژول Joule heat موسوم است. اثر سيستم هاي بافري و pH پروتئين ها به علت خصوصيت آمفوتري خود تحت تاثير pH  محيطي که در آن قرار داشته باشند بارالکتريکي خاص خود را نشان مي دهند منبع الکتريکي انتخاب نوع پارامتر ثابت در منبع الکتريکي در حين الکتروفورز,

مدت زمان مورد نظر براي انجام الکتروفورز,
الزام به حداقل رساندن انتشار نمونه
مقدار از دست دادن فعاليت نمونه که بر اثر حرارت و در طول زمان رخ مي دهد,
نياز به حفظ دماي خاص براي انجام الکتروفورز نمونه هاي لود شونده انواع نمونه ها
نمونه هاي محلول
نمونه هاي بافتي
نمونه هاي سلولي


سلولهايي كه در محيط آزمايشگاه به صورت سوسپانسيون رشد داده
سلولهايي كه در محيط هاي جامد كشت داده مي شوند


يک مشکل خاص در آناليز نمونه هاي بافتي ماهيت ناهمگون اين نمونه ها است آماده سازي نمونه اولين قدم ليز سلولها و خارج ساختن محتواي پروتئيني آنهاست
روشهاي متفاوت  مکانيکي و شيميايي درليز و متلاشي ساختن سلولها به کار گرفته مي شود
خارج ساختن موادي نظير نمكها، ليپيدها، پلي ساكاريدها، و اسيدهاي نوكلئيك

افزودن بافرهاي محلول سازي و...