
حجم فایل : 617.8 KB
نوع فایل : پاور پوینت
تعداد اسلاید ها : 27
بنام خدا زیست و آزمایشگاه سال چهارم
مهندسی ژنتیک نامهای دیگر: تکنولوژی زیستی، فناوری DNA نوترکیب، دستورزی ژنی
تعریف: فرایند دستورزی در ژنها برای دستیابی به هدفهای مختلف که از مهمترین آنها تولید ژن یا فرآورده آن به مقدار انبوه میباشد. تاریخچة ابداع:
الفـ دانشمندان: استانلی کوهن، هربرت بایر
بـ- نوع آزمایش: وارد کردن ژن سازنده rRNA از نوعی قورباغه آفریقایی به DNA باکتری اشریشیاکلای
ج ـ نتیجه آزمایش: تولید اولین جانداری که از طریق مهندسی ژنتیک تغییر یافته بود باکتری اشریشیاکلای مراحل اساسی مهندسی ژنتیک
مرحله اول: برش دادن DNA
اهداف:
ـ برش دادن DNA حاوی ژن موردنظر در 2 نقطه برای آزادسازی ژن موردنظر (ژن خارجی)
ـ برش دادن DNA وکتور در یک نقطه برای ایجاد محلی مناسب برای قرارگیری ژن خارجی
ابزار مورد نیاز: آنزیم محدودکننده (نوعی نوکلئاز) الف-تعریف: آنزیم باکتریایی که توالی خاصی از DNA به نام جایگاه تشخیص آنزیم را شناسایی میکند و DNA را در آن محل برش میدهد (پیوند فسفو دی استر بین نوکلئوتیدهای یک رشته از DNA را قطع میکند.)
ب-نمونه کار آنزیم: تولید قطعات کوتاه تک رشتهای DNA در هر دو انتها که با یکدیگر مکمل هستند.
(انتهای چسبنده) و میتوانند به هم متصل شوند. ج-ویژگی جایگاه تشخیص: توالی دو رشته آن عکس یکدیگر است د-مثال: آنزیم محدودکننده ECORI
1-جایگاه تشخیص آنزیم: توالی نوکلئوتیدی
ـ شکست دو پیوند فسفودی استر
ـ شکست پیوند هیدروژنی بین 4 جفت باز آلی
2-تعداد نوکلئوتیدهای جایگاه تشخیص: 6 جفت
3-محل ایجاد برش: بین نوکلئوتید A و G ¬ نوکلئوتیدهای پورینی
4-تعداد جایگاه تشخیص آنزیم روی DNA وکتور: 1 عدد
5-انتهای چسبنده تولید شده: AATT و TTAA (هر دو انتها دارای 4 نوکلئوتید منفرد) مرحله دوم: تولید DNA نوترکیب
تعریف: تولید DNA از ترکیب دو DNA متفاوت (ژن خارجی و DNA وکتور)
ابزارها:
(a وکتور (حامل) انواع:
الف) ویروس: آلودهسازی یوکاریوتیها
ب) پلازمید (کروموزوم کمکی)
ج)پلازمید Ti: آلودهسازی گیاهی پلازمید (کروموزوم کمکی) :
تعریف: مولکولهای DNA حلقوی کوچکی که در بعضی از باکتریها هستند.
ویژگیها:
1ـ حاوی ژنهایی هستند که در DNA کروموزومی اصلی وجود ندارد.
2ـ بعضی از آنها حاوی ژنهای مقاومت به آنتیبیوتیک هستند.
3ـ میتوانند مستقل از کروموزوم اصلی، در زمان عدم تولیدمثل سلول، همانندسازی کنند. باکتریوفاز:
تعریف: ویروس DNA داری است که باکتریها را آلوده میسازد.
ویژگی: بعد از آلوده شدن باکتری، DNA ویروس در سلول میزبان شروع به همانندسازی میکند.
تعریف: وسیلهای که به کمک آن ژن موردنظر به درون سلول باکتری هدایت میشود. b)آنزیم محدودکننده:
ـ نوع آنزیم: همان آنزیمی که برای ایجا...