مرجع دانلود پاورپوینت های درسی

حجم فایل : 223.0 KB
نوع فایل : پاور پوینت
تعداد اسلاید ها : 24
بسمه تعالی اسپکتروفتومتر در بیوشیمی
کاربرد اسپکترو فتو متری در بیو شیمی اسپكتروفتومتري
بوسيله اسپكتروفتومتر شدت رنگ محلولها را با دقت اندازه گيري مي كنند.
دستگاههائي كه براي رنگ سنجي به كار برده مي شوند الكتروفتومترو يا اسپكتروفتومتر ناميده مي شوند.
اکثریت قریب به اتفاق سنجش های بیوشیمیایی به روش های کالریمتری و یا اسپکتوفتومتری انجام می پذیرد،که بر اساس ارتباط بین شدت جذب نور (absorbance) و یا عبور نور (transmittance) توسط غلظت های مختلف از ماده مورد نظر،بنا شده است. بطور كلي هر اسپكتروفتومتر:
يك منبع نوراني،
يك وسيله ايجاد نور تكرنگ با طول موج مشخص
يك سلول يا لوله مخصوص براي جادادن محلول رنگي
، يك سلول فتوالكتريك و يك گالوانومتر دارد. اندازه گيري غلظت يك محلول به دو روش مي توان غلظت يك محلول را اندازه گيري كرد:
الف) از راه اندازه گيري نوري كه از محلول رنگي خارج مي شود و
به آن ،Transmitance ،یا عبور می گویند؛
ب) اندازه گيري مقدار نوري كه جذب محلول رنگي مي شود و به آن دانسيته اپتيك (OPTICAL DENSITY) O.D يا آبسوربنس مي گويند.










الف) دانسيته اپتيك يا آبسوربنس
نوري كه از يك محلول رنگي عبور مي كند مقداري از آن جذب محلول رنگي مي شود .
اگر Io شدت نور اوليه و I شدت نور خارج شده از محلول باشد بنابراين I a شدت نوري است كه جذب محلول رنگي گرديده است.
Ia = I - Io
Log Io - log I =OD = Absorbanc
logI/I0=OD



(1) log I0/I=OD

جذب از دو قانون پيروي مي كند:
مطابق قانون بيرولامبرت (BEER & LAMBERT) هنگاميكه نور يك رنگ از محلول رنگي عبور ميكند مقدار نوري كه به وسيله محلول جذب مي شود ويا مقدار نوري كه از محلول خارج مي شود؛
به غلظت ماده رنگي موجود در محلول
به ضخامت لوله ايكه نور از آن عبور كرده بستگي دارد.یعنی:
OD=KCL = جذ ب
قانون بیر لامبرت
logIo/I= KCL
كه در آن K ضريب جذب ماده مورد آزمايش، C غلظت جسم مورد آزمايش و L قطر لوله مي باشد و چون معمولاً قطر لوله را مساوي يك سانتي متر اختيار ميكنند بنابراين خواهيم داشت: OD= log I0/I=KC
K يا ضريب جذب ماده براي مواد مختلف فرق مي كند و به آساني قابل اندازه گيري است.

نحوه درجه بندی دستگاه اسپکتروفوتومتر روي صفحه مدرج دستگاه در قسمت بالا درصد نور عبور كرده يا ترانسمیتانس
در قسمت پائين درست در مقابل درجات ترانسمیتانس OD،یا ابز ربنس قرار مي هند.
، درجات میزان عبور همه با هم مساوي است.
د...